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Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/123456789/454

Title: Diversidade bacteriana no biofilme subgengival de indivíduos com periodontite agressiva localizada.
Authors: RIBAS, Tânia Rocha Cabral
???metadata.dc.advisor???: FAVERI, Marcelo de
Keywords: Periodontite agressiva
Microbiota subgengival
Gene 16S rRNA
Sondas Genômicas
Issue Date: 2012
Series/Report no.: 617.632 R482d
Abstract: O objetivo deste estudo foi determinar a diversidade bacteriana no biofilme subgengival de indivíduos com periodontite agressiva localizada (PAgL) e com saúde periodontal (SP) usando métodos moleculares independentes de cultura baseados na clonagem do gene 16S rRNA pelo método de Sanger. Quinze indivíduos com PAgL e 15 indivíduos com saúde periodontal (SP) foram selecionados. Nos indivíduos com PAgL, foram coletadas amostras de placa subgengival de 2 sítios subgengivais, sendo um sítio com profundidade de sondagem (PS) > 5mm com sangramento a sondagem e um sítio com PS < 3mm sem sangramento à sondagem (SS). Nos indivíduos com SP foi coletado 1 sítio subgengival com PS < 3mm como controle. O DNA de todas as amostras foi extraído e posteriormente a presença de Aggregatibacter actinomycetemcomitans de máxima e mínima leucotoxicidade foi avaliada por reação em cadeia da polimerase (PCR). Posteriomente, o gene 16S rRNA foi amplificado usando o par de iniciadores universais 4F - 1541R e 4F - 1492R. Os genes amplificados foram clonados, seqüenciados e identificados comparando com o banco de dados de seqüências 16S rRNA. Nove dos 15 indivíduos com PAgL eram colonizados pelo A. actinomycetemcomitans, sendo que 7 apresentavam a cepa de alta leucotoxicidade. Em relação à análise clonal do gene 16S, um total de 2.041 clones foram sequenciados, sendo 697 clones para as bolsas profundas (PS>5mm) do grupo com PAgL, 666 clones para as bolsas rasas (PS<3mm) do grupo PAgL e 678 clones para as amostras (PS<3mm) nos indivíduos com SP. Cento e sessenta e quatro diferentes espécies/filotipos foram identificadas nas 45 amostras analisadas sendo que 42% destas espécies ainda não foram cultivadas. Nos indivíduos com saúde periodontal, espécies do gênero Streptococcus representaram cerca de 32,7% dos clones analisados. Por outro lado, este gênero representou apenas 14,1% e 13,0% dos clones encontrados nos sítios rasos e profundos dos indivíduos com PAgL, respectivamente. Actinomyces sp. BL008/OT171 e Actinomyces sp. IP073/OT448 foram as espécies de bactérias ainda não cultivadas encontradas em freqüência e número de clones mais elevados nos indivíduos com saúde periodontal. Parvimonas micra, Selenomonas sputigena, Filifactor alocis, Pseudoramibacter alactolyticus, Dialister pneumonsites, Dialister invisus, Synergistes sp BH007/OT359, Prevotella sp. AH125/OT292, Desulfobulbus sp. R004/OT041, Selenomonas sp. DS051/OT137, foram as espécies de bactérias incomuns ou ainda não cultivadas encontradas em freqüência e número de clones mais elevados nos indivíduos com periodontite agressiva localizada. Em conclusão, a diversidade da microbiota subgengival de indivíduos com PAgL difere marcadamente da observada em indivíduos periodontalmente saudáveis, sendo que existem diferenças entre a diversidade bacteriana presente nos sítios rasos dos indivíduos com PAgL e sítios rasos com saúde periodontal.
URI: http://hdl.handle.net/123456789/454
???metadata.dc.type???: Tese
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